Guanidinschwefelcyanat Verwendung und Synthese |
Gebrauch | Guanidinschwefelcyanat ist benutzt worden: • für die Zerstörung der colorectal Adenocarcinomazellform vor RNS-Isolierung • als PCR-Hemmnis in triplex Probe qPCR des mitochondrialen DNA (mtDNA) |
Biochemie/physiol Aktionen | Guanidinschwefelcyanat ist ein Denaturierungsmittel und wird routinemäßig in der RNS-Isolierung verwendet. Es wird als Speicherpuffer für Vollblutproben verwendet. Guanidinschwefelcyanat inaktiviert nucleases und ist für die Speicherung und das Einfrieren von fäkalen Proben für DNA-Studien ideal. Es wird im Verbindung mit phenol−chloroform in der RNS-Extraktion verwendet. |
Beschreibung | Guanidinschwefelcyanat ist eins von den billigsten und am einfachsten, sich von den Guanidinsalzen vorzubereiten. Guanidin-Schwefelcyanat ist ein Gradreagens der ultrapure, Molekularbiologie. Es ist von der nachweisbaren Nuklease- und Proteasetätigkeit frei und ist ein starker Proteindenaturant, als das guanidinium Kation und das Schwefelcyanatsanion sind chaotropic Mittel. Es wird in einer Flasche zur Verfügung gestellt, die 500 G. enthält. Es wird für Isolierung von RNS, besonders für Gewebe wie Pankreas mit hohen Stufen der RNasetätigkeit empfohlen. In gelöster Form bekannt es als guanidinium Schwefelcyanat. Guanidin-Schwefelcyanat wird gänzlich auf die Verseuchung des unspezifischen Endonuclease, des exonuclease und der RNasetätigkeit geprüft. |
Gebrauch | Es wird hauptsächlich für Biomedizin, chemische Reagenzien verwendet. Guanidinschwefelcyanat ist ein starker Proteindenaturant (stärker als Guanidin HCl) häufig benutzt in der Isolierung der intakten Ribonuclein- Säure, zum von RNasetätigkeit zu beseitigen. RNase kann Tätigkeit, nachdem sie wieder herstellen, aber gekocht hat, wird irreversibel in einer 4 m-Lösung des Guanidinschwefelcyanats inaktiviert. Solche Lösungen, denen das Reduktionsmittelbmerkaptoäthanol häufig hinzugefügt wird, werden benutzt, um RNase zu inaktivieren, wenn man RNS von den Geweben, die in der RNase reich sind, wie Leber lokalisiert. Gesamtkern- und zellplasmatischer RNS wird auf diese Weise lokalisiert möglicherweise. Ein Protokoll für die Extrahierung von RNS mit Guanidinisothiozyanat ist veröffentlicht worden. In Anwesenheit des Guanidinschwefelcyanats lösen sich Proteine bereitwillig auf, lösen sich Zellaufbauten auf und Nucleoproteins trennen sich von den Nukleinsäuren, da Proteinsekundärstruktur verloren ist. |
Giftigkeitsbewertung | Guanidinschwefelcyanat wird Handels- als Desinfektionsmittel und allgemeiner Proteindenaturant benutzt, aber sein allgemeinerer Gebrauch ist in der Extraktion von DNA und von RNS in der Molekularbiologie. Нere sind keine Berichte von Guanidinschwefelcyanatsgiftigkeit von der Mundeinnahme. Giftigkeit von diوٴerent Schwefelcyanatsmitteln anders als Guanidinschwefelcyanat ist beschrieben worden. Kaliumschwefelcyanat wurde 50 Jahren vor für die Behandlung des Bluthochdrucks und benutzt seine Giftigkeit scheint, eine bestehende generalisierte Schwäche in der neurologischen Erkrankung, Delirium und ein Abnahmeniveau des Bewusstseins zu verursachen. Berichte von Schwefelcyanatsgiftigkeit vom Nitroprussidgebrauch für Bluthochdruck in der Einstellung der Nierenbeeinträchtigung/des Ausfalls sind auch berichtet worden, während Schwefelcyanat renally geklärt wird. In einer tödlichen überlegten Einnahme eines Herbizids, das Ammonium Schwefelcyanat und aminotriazole, ein Mann mit 54 Jährigen, der mit Koma dargestellt wurden und Kreislaufkollaps enthielt, obgleich die relativen Beiträge der zwei Herbizide zur klinischen Giftigkeit unbekannt ist. |
Chemische Eigenschaften | Weißes cryst.powder |
Gebrauch | Starker Proteindenaturant isoliert benutzt von intakter DNA, RNS. |
Gefahr | Reizmittel. |